Resumo

As indústrias petroquímicas, em suas atividades de exploração, produção, refino, transporte e comercialização de petróleo e derivados, geram resíduos tóxicos ao ambiente que necessitam de tratamento. Além disto, vazamentos acidentais de petróleo decorrentes destas atividades são freqüentemente noticiados em todo mundo, com conseqüências catastróficas ao ambiente e à população. Estes resíduos produzidos por indústrias apresentam estruturas moleculares que não são reconhecidas pelas enzimas degradativas, resistindo à biodegradação. Hidrocarbonetos aromáticos são considerados recalcitrantes devido à existência de um anel aromático, onde a ressonância de ligações fornece a estabilidade da molécula. Os Landfarm são uma estratégia de biorremediação utilizada pelas indústrias petroquímicas para a redução desses poluentes. Duas bibliotecas metagenomica foram construídas a partir de solo de landfarming, a fim de verificar a via utilizada para a mineralização de benzeno e o padrão de expressão de proteínas por eletroforese em gel de SDS-poliacrilam. Amostras de solos de landfarm foram coletados para extração de DNA com o kit PowerMax® Soil DNA Isolation, e sua biblioteca foi construída com o Kit CopyControl™ Fosmid Library Production. , que clona fragmentos de DNA entre 25-45 clones Kb. Os clones foram selecionados quanto à capacidade de expressar enzimas capazes de clivar compostos aromáticos. Para isto, foram crescidos em meio de cultura contendo L-arabinose, cloranfenicol e benzeno e testados quanto à clivagem do catecol, substância intermediária para a via de clivagem do anel benzênico. Foram encontrados nove clones positivos para orto clivagem e um clone positivo para meta clivagem, estes foram novamente crescidos nas mesmas condições, realizado a extrações das proteínas e analise em gel SDS-page. A análise protéica demonstrou diferença no padrão de bandas, comparando amostras crescidas em meios induzido e não induzido. Estes resultados são de grande interesse biotecnológico uma vez que os BTX são compostos presentes na gasolina e comuns nos vazamentos de petróleo. Além disso, confirma a eficácia do uso da ferramenta da metagenômica que envolve os microrganismos não cultiváveis e seu potencial na biorremediação de lugares contaminados.